拟南芥培养攻略
- 格式:doc
- 大小:223.50 KB
- 文档页数:2
拟南芥培养全攻略
拟南芥又名阿拉伯芥,属十字花科,为二年生草本植物。具有植
株形态小,平铺直径5cm ,高30cm ;生长区域小,易于培养;基
因组小,只有5条染色体,15700万个碱基对,27000个基因;生
长速度快,周期短,一个世代大约只需要6周的时间;可自花授
粉,也可以在不同种质系间杂交,种子多,每株每世代可产数千
粒种子等特点。因此,拟南芥是植物科学,包括遗传学和植物发
育研究中的模式植物之一(图1)。在2000年,拟南芥成为了第一
个基因组被完整测序的植物。
尽管拟南芥生长周期短,且易于培养,但根据不同的实验需
求,在培养过程中,对光照、水分及湿度等各种条件的控制有所
差别,利用PERCIVAL AR 系列拟南芥培养箱可设置不同的生长环
境,满足不同的实验需求。
一、 正常培养 简单的拟南芥培养,可用于基因表达、器官发育、基因突变等研究。
1、 首先把拟南芥种子放到滤纸上,用70%酒精进行消毒处理,再用无水酒精进行处理(也可选择20%漂白剂以及0.05% Triton X-100 非离子表面活性剂做杀菌处理20分钟)。用无菌水冲洗5遍,然后将种子点到MS 培养基上,pH5.9,另加0.9%琼脂以及2%蔗糖。
2、 把种子放到4℃黑暗条件下进行
春化48h-72h 左右,在长日照或短
日照条件下催芽,然后转到
PERCIVAL AR 系列培养箱中(图2)。
利用Intellus 控制器,编辑简单的昼夜模式,设定光照时间
16小时(黑暗8小时)或者光照14小时(黑暗10小时);选
配Q22连续光强调节装置,设定光照强度为100-150umol/m 2.s;
设定箱体内温度为光照条件下20-22℃,黑暗条件下18-20℃;
选配湿度控制系统,设定箱体内相对湿度70%。
3、 出苗大约7~10天,然后移入土中培养,采用底部灌溉方式浇水(利用土壤的毛细作用)。在第一次浇水前,可使土壤完全干燥,以后每隔7~10天浇一次水。
4、 土壤可用营养土、蛭石以及珍珠岩比例10:1:1
的比例配置,也可直接用堆肥、蛭石以及草炭
等进行混合。在生长过程中,可用普通的花肥
施肥一次或者不施肥。
5、 当植株长到一定高度时,可剪断茎杆,以产生
更多的花序,可用于转化研究或者获得更多的
种子(图3)。
二、 特殊培养
为了加快拟南芥生长速度,在移入土壤培养后,可设定长日照,利用Intellus 控制器,
编辑程序设定24h 光照,光强100-250umol/m 2.s ,温度持续22-23℃。
AR 系列培养箱 图1
图2
图
3
拟南芥根系处理培养,可减少光照时间为8-12h,提高光照强度为100-350umol/m2.s,温度为光照条件下22-23℃,黑暗条件下18-20℃,其余培养条件同正常培养。