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艾滋病常用实验室检测及临床意义分析
艾滋病常用实验室检测及临床意义分析
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检测程序及流程图
1、筛查检测 验收标本,用筛查试剂进行检测,如呈阴性反应, 报告抗体阴性;对呈阳性反应的标本,须进行重 复检测。
2、重复检测 对筛查呈阳性反应的标本用原有试剂和另外一种不 同原理或不同厂家的试剂重复检测。
抗体筛查检测流程
样品
初筛检测
筛查试剂
阳性反应
阴性反应
原有试剂和另外一种不同原理 (或厂家)的试剂,或另外两 种不同原理或不同厂家的试剂
(三)血清样品采集:用注射器抽静脉血3-5, 室温放置1-2小时,待血液凝固或用3000离心15分 钟,吸出血清备用。 (四)抗凝血样品采集(免疫功能48测定、血液常 规测定、病毒载量):用加有抗凝剂(K3)的真 空采血管或试管抽取静脉血,反复轻摇,常温6小 时以内送达实验室检测48或后,再分离血浆和血
诊
死
断
亡
艾
滋
病
艾滋病患者
急性感染期
1
2
3
4
1
感染后血液中核酸、抗原和抗体动态变化
p24
检测域
暴露
天数
窗口期
感染后病毒载量、4与病程变化规律
艾滋病实验室分类
筛查实验室(4检测实验室) 确证实验室(4、病毒载量实验室…)
中国实验室网络
国家艾滋病参比实验室 中国性艾中心
艾滋病确认中心实验室 省、市
(五)血清或血浆样品应存放于-20℃, 短期内( 1周)进行检测的样品可存放于2-8℃。
(六)用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应 冻存于-20℃以下,进行病毒 检测的样品如长期(3个 月以上)保存应置于-80℃。
二、样品的运送 (一)抗体检测实验室间传递的样品应为血清或
血浆,血液常规、4和病毒载量等要求送抗凝血 。样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的 标记,标明样品的编号或受检者姓名、种类和采 集时间。
检测要点
1、严格按照试剂说明书操作,不得擅自更改。 2、注意防止交叉污染。 3、严格遵守实验室操作规程。 4、认真做好实验记录。
抗体检测结果及结论
抗体筛查结果阴性反应可做抗体阴性 报告,筛查试验呈阳性反应,可出具“抗体 待复查”报告,不能出抗体阳性报告。筛查 阳性反应或可疑阳性反应不能作最终报告
重复检测
均阳性反应
一阴一阳
送确认实验室确认
均阴性反应 报告阴性
抗体确证
1、常用的确证实验方法是免疫印迹法()。
2、免疫印迹试剂有1/2混合型和单一型。一般先 用1/2混合型试剂进行检测,如果呈阴性反应, 则报告抗体阴性,如果呈阳性反应,则报告1抗 体阳性,如果不满足阳性标准,则判为抗体不确 定。如果出现2型的特异性指示条带,还需要用2 型免疫印迹试剂再做单一的2型抗体确认试验, 呈阴性反应,报告2抗体阴性;呈阳性反应的则 报告2抗体血清学阳性。
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艾滋病确认实验室
省、市
艾滋病筛查中心实验室 省、市、州、县
艾滋病筛查实验室
省、市、州、县
艾滋病检测点
乡、镇
实验室条件
人员:经过专门技术培训,取得培训合格证/上岗证; 环境:功能分区,符合生物安全二级要求; 仪器设备:按要求配备,满足检测要求。 实验室必须经过资质认证/验收!
病原体诊断
抗体检测 艾滋病病毒抗原检测(P24) 核酸检测 病毒分离
艾滋病常用实验室检测及临床意义分析
主要内容
抗体检测 4检测 病毒载量检测 实验室安全防护
感染艾滋病毒后的自然发展过程
急性感 染期
HIV抗体-
- 4-8周-
潜伏期
HIV抗体+ 无症状 2-10 年
发病期
HIV抗体+
有症状 艾滋病
1年
0.5-2年
感
抗
染
体
成
转
功
阳
窗口期
出 现 症 状
艾滋病感染者
抗体检测的目的
诊断 确定个体感染状况,包括临床检测、自愿咨
询检测、根据特殊需要进行的体检等。 血液筛查 防止输血传播,包括献血员筛查和原料血浆筛
查。 监测
抗体检测的方法
筛查试验(包括初筛和复检):酶联免疫吸附试验()、 化学发光试验、明胶颗粒凝聚试验()、免疫渗滤试验、 免疫层析试验等
检测样品
血清、血浆 尿液 抗凝全血(、4、…) (外周血淋巴细胞)
样品的采集和处理
一、样品的采集 最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血(抗凝
血)。 唾液或尿液有时也可作为测试样品。常用样品的采
集方法如下: (一)采集样品应按临床采血技术规范及检测试剂盒要 求进行。 (二)采集标本时应注意安全,操作应戴双层手套。建 议采用真空采血管及蝶形针具,以免直接接触血液。
检测结果的报告和处理 抗体筛查: 筛查实验呈阴性反应出具抗体阴性报告,如果 近期有高危行为,如性乱、注射毒品等,或有 急性流感样症状等情况,为排除“窗口期”的可 能,建议2—3个月以后再做抗体检测。 筛查实验呈阳性反应,可出具“抗体待复查”报 告,不能出阳性报告。
(二)将试管放入专用带盖的容器内,容器的材 料要易于消毒处理。在试管的周围应垫有缓冲吸 水材料,以免碰碎。如果路程较远或气候炎热, 应在2-8℃条件下运送。抗凝血和抗体检测样品路 程短可常温送检。包装内需附有送检单。
(三)特殊情况下如需对个别样品进行复测,可以 用特快专递形式投寄,但必须将盛样品的试管包 扎好,保证不会破碎和溢漏。
三、样品的接收 (一)含有感染性样品的包裹必须在具有处理感 染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开, 用后的包裹应进行消毒。 (二)核对标本与送检单,检查样品管有无破损 和溢漏。 (三)检查样品的状况,记录有无严重溶血、微 生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。 (四)因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不可 用于荧光方法测试。
确证试验:免疫印迹试验()、条带免疫试验、放射免疫 沉淀试验、免疫荧光试验等。
艾滋病抗体确证试验
免疫印迹法()为目前最常用的抗体确认方法,被公 认为判断感染的黄金方法。
艾滋病抗体检测试剂使用条件
筛查或确认试剂必须是1+2混合型,国家卫生 部批准或注册,经过国家医药监督管理局批批检 合格,临床试剂评估优良,并且在有效期内。
抗体确证检测流程
筛查试验阳性反应样品
免疫印迹法(WB,HIV-1/2混合型)
阴性反应
HIV-1阳性反应
不确定反应
报告阴性
报告HIV-1阳性
出现HIV-2指示条带
根据具体情况进一步检测HIV-2
结合流行病学资料,可以在4周后随访检测,如带型没有进展或呈阴性反应,则报告阴性;如随访期间出现阳性反应,则报 告阳性;如随访期间带型有进展,但不满足阳性标准,应继续随访到8周。如带型没有进展或呈阴性反应则报告阴性;满足 HIV抗体阳性诊断标准则报告阳性,不满足阳性判断标准可视情况决定是否继续随访。
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