新生儿溶血病的实验室检查复习过程

溶血检查步骤
溶血检查是一种检查红细胞膜完整性的常规检查之一，其主要步骤如下：
1. 采集血样：用无菌技术采集3-5ml的静脉血样，放入干净的试管中。

2. 标本处理：将采集得到的血样放置在室温下，待血液凝固后，用离心机离心10分钟，将血清和红细胞分离开。

3. 准备溶血试剂：将0.9%的氯化钠溶液加热至37℃，作为溶血试剂备用。

4. 加入溶血试剂：将离心后的红细胞沉淀中加入适量的溶血试剂，轻轻振动混合。

5. 孵育：将试管放置在37℃恒温水浴中孵育30分钟。

6. 观察结果：孵育后观察，如出现溶血现象，则说明红细胞膜有破损或缺陷，不能完全抵抗溶血试剂的作用。

需要注意的是，溶血试验是一种半定量检测方法，不同的检测条件和试验操作可能会对结果产生影响，因此，不同的实验室可能会有不同的标准和参考范围，需要根据具体情况进行解读。

新生儿溶血病血清学检查标准操作规程(一)检验目的检测孕妇产前与其丈夫ABO及Rh血型相容性、孕妇IgG 抗体效价、产后新生儿体内不相容抗体存在情况、新生儿与产妇之间血型相容性，为新生儿溶血病的预防、诊断及治疗提供可靠的实验室依据。

(二)检验原理新生儿溶血病是由母婴血型不合，母亲体内与新生儿红细胞抗原不配合的IgG性质的血型抗体进入新生儿体内，破坏新生儿或胎儿红细胞而引起，可发生在胎儿期和新生儿早期，溶血严重者可出现死胎而流产，存活者则有不同程度的新生儿黄疸。

新生儿溶血病产前诊断方法主要包括检测胎儿父母的ABO及Rh血型、孕妇不规则抗体筛查、外周血抗A ／抗B或Rh抗体效价来判断新生儿溶血病发生的可能性及严重程度；新生儿溶血病产后诊断主要包括母子ABO及RhD 血型鉴定试验、新生儿标本三项试验，为临床诊断及进一步采取治疗手段提供可靠的依据。

(三)适用范围适用于新生儿溶血病产前、产后血型血清学试验。

(四)设备性能参数参见血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Ortho BioVue离心机及各全自动血型／配血系统使用说明书。

(五)器材与试剂1.器材血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Or-tho BioVue离心机、塑料软试管、塑料硬质试管(75mmXl2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液枪、一次性移液枪头。

2.试剂DiaMed ABO／RhD血型卡、OrthoBioVueABO ／RhD血型卡、抗A、抗B血清、Rh分，型血清、生理盐水、抗球蛋白试剂(市售单克隆)、抗体筛查试剂红细胞、抗体鉴定试剂红细胞、致敏的阳性对照细胞(自制)。

(六)标本要求1.夫妇标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无溶血及明显乳糜。

2.患儿标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无明显乳糜。

产前血型血清学检查标本要求：夫妻双方抗凝血2ml（尽量要求父亲抗凝血2ml，非必要），母亲促凝血3-5ml（血清）。

第一步：取两个试管分别标记 A 和BA管 700 μL生理盐水 B管（从A管取200 μL混合液+100 μL母亲血清混匀再加入200 μL血浆IgM稀释液）混匀 B管封口绑紧37℃温育1小时。

第二步:紧接着做父母ABO血型、RH型和母亲的不规则抗体。

第三步：取六个试管，分别标记123456，每管里面加200 μL盐水（父亲AB型需要同时做IgG抗A效价和IgG抗B,各做1次）。

第四步：等B管温育时间到了，从B管吸200微升到1管，混匀后从1管吸200 μL到2管........从5管吸200 μL到6管，依次添加稀释（倍比稀释）。

第五步：取不规则卡标记好 6 5 4 3 2 16 5 4 3 2 11.所有孔先分别加入50 μL父亲（与父亲同型）的0.8%红细胞悬液。

2.然后每孔再依次加入相对应管号里面的稀释液50 μL（防止交叉污染，从浓度最低往最高依次加）。

第六步：1.放到37℃温箱温育15分钟。

2.离心5分钟，取出判读结果。

注：判读结果往前推一位（例如6号孔是阳性，就报5号管是阳性）。

母亲RhD阴性血型，不用加入血浆IgM稀释液，不用37℃温育1小时。

直接第二步同上。

产后血型血清学鉴定标本要求：新生儿抗凝血2-3ml第一步：1.收到标本之后离心2分钟，取两个空试管，标记红细胞1和血浆2。

红细胞1 血浆22.将离心好的血样中血浆全部吸入空试管2中，剩余的红细胞吸入另一空试管1中。

3.向试管1中加3000μL生理盐水，进行洗涤，洗涤红细胞三次后，取压积红20μL+2480μL盐水加入新的试管中配制成0.8%红细胞。

（剩余的压积红留着做放散液）。

第二步;直抗试验、血型试验取0.8%红细胞50μL分别加入血型卡和不规则抗体卡中（只加一个孔）做好标记，直接离心五分钟看结果。

第三步：游离试验、放散试验1.取试管1中压积红1000μL+盐水1000μL（1:1适量配比）。

输血科新生儿溶血病血型血清学检查标准操作规程1、目的：规范血液免疫学产前检查操作，确保试验过程及结果的准确性与可靠性。

2、范围：本规程适用于实验室血液免疫学产前检查试验操作。

3、职责：经授权的血型实验室试验人员负责血液免疫学产前检查试验过程及报告的发出。

4、原理孕妇和丈夫ABO血型不合（O/A、O/B、O/AB、A/B、A/AB、B/A、B/AB）时，孕妇体内的IgG抗A（B）可能会引起新生儿溶血病的发生。

本试验通过检测孕妇血清中有无IgG性质的抗A（B）抗体及其效价（应用巯基试剂破坏IgM抗体，检测IgG抗体效价）即可预测ABO系HDN发生的可能性。

应用筛选红细胞可检测孕妇血清中是否存在不规则抗体，如果存在，应用谱细胞进行抗体鉴定，确定抗体的特异性，进一步检测非ABO系新生儿溶血病。

5、所需设备、材料或试剂：37℃恒温水浴箱、细胞洗涤离心机、抗-A抗-B血型定型试剂（单克隆抗体）、抗-D RH血型定型试剂（单克隆抗体）、凝聚胺介质试剂、抗人球蛋白试剂（抗-IgG、C3d）、（A、B、O）型标准红细胞悬液（2—5%）、商品化筛选细胞、谱细胞、2—ME试剂、12×75mm试管、塑料滴管。

6、检测环境条件：温度：18—25℃；湿度：30—70%7、标本要求7.1标本接收在接收标本时，应尽可能的了解、核对、记录患者的相关资料，包括受血者姓名、年龄、性别、临床诊断、输血史、用药史、妊娠史、标本编码等；7.2检验人员收到被检者产前检查申请按照申请单内容在试管上做标记(用记号笔在试管上标明被检者姓名、性别)，保留申请记录。

7.3按照要求进行血液采集。

将采好的血液沿试管壁注入已标识的抗凝试管中，反复颠倒混匀，放入2-8℃冰箱待用。

并填写《外来标本交接记录》及相关记录。

7.4标本的种类与数量：产前检查需送夫妇血样，血样均需抗凝（EDTA抗凝），女（母）5ml，男3ml。

7.5标本的保存与处理：完成所有试验内容后，要仔细核对实验结果，发出实验报告后，将实验所用的标本原始送检管存于2-8℃冰箱内至少7天以便进行查找和核对，之后交由单位相关部门统一处理。

新生儿溶血病检测操作规程一、项目名称、检验方法名称1.项目名称：新生儿溶血病检测（包括直接抗人球蛋白试验、游离试验和放散试验三项）2.检验方法名称：柱凝集二、方法学原理该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。

正常具有抗原的人红细胞将与相应的抗体发生凝集反应，BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。

加入红细胞并将试剂卡离心后，发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面，而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。

三、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1.试剂卡品牌：美国强生奥索2.代号：BioVue-po1yCassettes3.包装规格：400卡/箱试剂卡（707300）；100卡/箱试剂卡（707350）4.试剂成分:抗人球蛋白（1gG,C3b∕C3d）检测卡有6根微柱组成，每一柱中含有缓冲液,其成分为牛血清蛋白，大分子增强剂以及0.1%叠氮钠,0.0IM的EDTA.成分描述第1〜6柱：抗人球蛋白、抗抗一IgG（兔）-IgG.-C3d；多特异性抗一C3b（鼠单克隆）（克隆F7G3）抗一C3d（鼠单克隆）（克隆C4C7）FD&C1#蓝色染料FD&C5#黄色染料5.试剂的储存与效期：储存条件：2〜25。

C环境保存。

请勿将试剂存放在自动除霜的冰箱中，也不要冷冻保存。

并且不要放在离热源（如孵育箱、辐射器、大型设备、冰箱、冰柜等）很近或阳光直射的地方。

效期：试剂盒上有记载四、仪器品牌、型号BioVUe专用离心机；BiOVUe专用孵育器五、样本的采集与准备：在采集标本前对病人/献血者无特殊要求。

含有或不含有抗凝剂的标本均可使用。

标本采集后应尽快进行检测。

如果实验不能立即进行，应将标本置于2—8。

C保存。

六、试剂准备：抗人球蛋白（IgG,C3b∕C3d）检测卡为即用型产品。

试剂卡应在铝箔开启后一小时内使用。

试剂卡经过运输颠簸后，需倒置一下，然后重新离心以备用。

新生儿溶血病检测操作规程1原理新生儿溶血病一般特指母婴血型不合而引起的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病（HDN），可由多种原因引起。

临床常见的是ABO、Rh等血型系统。

胎儿和新生儿红细胞被来自母亲的IgG抗体所包被，并在婴儿的网状内皮系统内受到免疫性破坏。

2试剂和材料2.1母亲血样3-5ml，患儿抗凝血3-5ml2.2抗人球蛋白试剂（包括广谱、IgG、C3）、2-Me应用液、抗-A、抗-B、抗-D、抗-C、抗-c、抗-E血清试剂2.35?、B、O型标准红细胞悬液3方法主要以三项试验为主①患儿直接抗人球蛋白试验②患儿游离抗体试验③吸收放散试验3.1ABO新生儿溶血病检测ABO新生儿溶血病主要是由于胎儿红细胞A或B抗原与来自母体的抗A或抗B 抗体反应的结果。

以母亲为O型，胎儿为A型或B型的发病率为最高。

3.1.1母、子（父）红细胞ABO血型鉴定（参照ABO血型鉴定）3.1.2子红细胞试验3.1.2.1子红细胞直接抗人球蛋白试验RBC生理盐水洗3遍，配成5%RBC悬液，取小试管加1滴2-5%子RBC，加多特异性抗球蛋白1滴，混匀离心看结果。

3.1.2.2子红细胞抗体放散试验：取经盐水洗涤的患儿压积RBC0.5-1ml,加等量盐水于试管中，56℃水浴，不断振摇10分钟，然后置于56℃温水离心管内，立即以1300g离心5分钟，吸取上清液备用。

取3只试管,标记Ac、Bc、Oc，将放散液分为3份分别加入3个小试管中，分别加2-5%A、B、O细胞1滴，37℃水浴1小时（加PEG缩短至5分钟），取出后用生理盐水洗涤3遍，倒尽盐水，各加抗多特异性抗球蛋白1-2滴，混匀离心看结果。

3.1.2.3子血清中游中游离抗体检查取3支小试管标明Ac、Bc、Oc，每管加患儿血清2-4滴，分别加入2-5%A、B、O指示红滴，混匀后离心，看结果。

如有凝集，说明有相应盐水抗体，不凝集将试1细胞盐水悬液．管放入37℃水浴1小时（加PEG5分钟）后，用生理盐水洗3遍，吸尽盐水后，每管加多特异性抗球蛋白1滴，离心看结果。

新生儿溶血病血清学检查操作规程原理新生儿溶血病是由母婴血型不合引起，可见于ABO、Rh及MN等血型系统。

胎儿和新生儿红细胞被来自母亲的IgG抗体包被，并在婴儿的单核-巨噬细胞系统（网状内皮系统）受到免疫性破坏，出现溶血，表现出相应的症状。

病情严重程度因个体差异、抗体类型、抗体效价等不同而异。

目的规范新生儿溶血病血清学检查操作；查找新生儿溶血病发生的原因，协助临床进行实验室诊断及治疗；保证临床用血的安全性和有效性。

职责输血科技术人员负责新生儿溶血病血清学检查。

适用范围母婴血型不合引起的新生儿溶血病的血标本。

支持文件《中国输血技术操作规程》（血站部分）.天津：天津科学技术出版社1997《输血技术学》第2版.北京：人民卫生出版社，2002《输血科（血库）工作手册》莞市中心血站2006材料或设备1、材料抗-A、抗-D定型试剂、抗球蛋白试剂、ABO反定型试剂红细胞、筛选细胞、谱细胞、生理盐水、新生儿静脉血、产妇及患儿父亲血标本2、设备血清雪专用离心机、电热恒温水浴箱、水浴振荡仪、显微镜、小试管、滴管、小玻棒操作步骤一、血标本采集及处理采集患儿及其父亲与母亲血标本各3-5ml，分离出血清，配制3%-5%红细胞盐水悬液。

如果患儿血标本为不抗凝血，则在一小玻璃漏斗颈部置一适当大小的棉球上，一边加生理盐水，一边用玻棒挤压血块，收集漏斗下面的红细胞悬液。

二、患儿血标本具体操作执行《ABO和Rh血型鉴定操作规程》。

ABO血型测定只做正定型。

1、直接抗球蛋白试验具体操作执行《抗球蛋白操作试验规程》中的直接抗球蛋白试验部分。

2、游离抗体检测⑴、取小试管3支，分别标明A、B、O细胞，每管加患儿血清2滴，再分别加入3%-5%的A、B、O、反定型试剂红细胞悬液1滴。

⑵、37℃致敏1h后取出，若发生凝集，不必继续往下做。

⑶、若不凝集，用盐水充分洗涤3次反应物后加入抗球蛋白血清1滴。

1300g离心15s，轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集反应，记录结果。

探讨不规则抗体导致的新生儿溶血病实验室检查及临床输血策略1. 引言1.1 背景介绍新生儿溶血病是一种严重的疾病，通常是由于母体与胎儿之间的ABO或Rh血型不合引起的。

在不规则抗体导致的新生儿溶血病中，孕妇体内产生了针对胎儿红细胞表面抗原的抗体，这些抗体可以穿过胎盘并攻击胎儿的红细胞，导致溶血反应。

新生儿溶血病可能会导致新生儿贫血、黄疸等严重并发症，甚至危及生命。

了解不规则抗体导致的新生儿溶血病的发病机制以及相关的实验室检查方法和临床输血策略对于及时诊断和治疗这一疾病至关重要。

本文旨在探讨不规则抗体导致的新生儿溶血病的实验室检查及临床输血策略，以期为临床医生提供更好的诊断和治疗方案。

对于这一严重疾病的认识和研究，不仅可以提高新生儿的生存率和生活质量，也有助于完善相关的临床指导和措施，从而更好地预防和治疗新生儿溶血病。

1.2 研究目的本研究的目的是探讨不规则抗体导致的新生儿溶血病在实验室检查及临床输血策略方面的问题。

通过深入了解溶血病的发病机制和不规则抗体的检测方法，我们希望能够为临床医生提供准确的诊断和治疗方案，有效预防和治疗新生儿溶血病，降低其对患儿的危害。

我们也希望能够总结出最佳的实验室检查方法和临床输血策略，为临床实践提供科学依据，提高新生儿溶血病的诊断和治疗水平，最终达到保护婴儿健康的目的。

通过本研究，我们希望能够为临床医生提供重要的参考信息，促进新生儿溶血病的早期诊断和有效治疗，提高患儿的生存率和生活质量。

1.3 研究意义新生儿溶血病是一种严重的疾病，可能导致新生儿贫血、黄疸甚至神经系统损伤等并发症。

而不规则抗体导致的新生儿溶血病在临床上并不少见，因此对其进行深入研究具有重要的临床意义。

研究不规则抗体导致的新生儿溶血病的发病机制，可以帮助医生更好地理解疾病的病理生理过程，从而制定更有效的治疗方案。

探讨不规则抗体的检测方法，有助于提高新生儿溶血病的早期诊断率，及时采取有效的治疗措施，降低患者的病情发展风险。

新生儿溶血病标准操作规程新生儿溶血病是一种严重的疾病，可能造成新生儿死亡或长期残疾。

为了保证患儿及时获得正确的诊断和治疗，制定一套完善的标准操作规程是非常重要的。

以下是一份新生儿溶血病标准操作规程，供参考。

一、前期准备1. 确保医护人员熟悉新生儿溶血病相关知识和诊疗流程。

2. 准备必要的设备和工具，包括实验室检测设备、输血设备、药物等。

3. 与新生儿家属进行沟通，解释疾病的诊断和治疗方案，取得家属的理解和同意。

二、病史获取和体格检查1.详细询问孕妇妊娠期间的相关情况，包括母体血型、产妇产程、新生儿出生时体重、颜色是否异常等。

2.进行新生儿的体格检查，包括皮肤黄疸程度、肝脾大小、异常出血点或斑点等。

三、实验室检查1.进行新生儿的血型鉴定，包括ABO血型和Rh(D)血型。

2.进行新生儿全血细胞凝集试验，以确定新生儿红细胞是否具有抗原抗体反应。

四、治疗1.根据新生儿溶血病的程度和临床表现，进行治疗的分类和评估。

2.对于轻度溶血病病例，给予观察和支持治疗，包括补液、护肤和黄疸照射等。

3.对于重度溶血病病例，进行积极治疗，包括输血、免疫抑制剂治疗等。

4.如果新生儿具有高风险因素（如Rh(D)不合并高抗体水平等），则可以考虑进行预防性治疗，包括Rh免疫球蛋白注射等。

五、预后和随访1.对于新生儿溶血病的治疗效果进行评估，包括黄疸程度、血红蛋白水平等指标的变化。

2.对于出院的新生儿患者，需要进行随访，包括定期复查血常规、肝功能、血型等指标，以监测病情的变化。

3.对于需要长期随访的新生儿患者，建议建立相关档案，做好记录和跟踪。

六、病例讨论和学术交流1.新生儿溶血病是一种复杂疾病，建议定期召开学术会议或病例讨论，以总结经验、交流治疗经验，并不断完善标准操作规程。

2.在学术交流中，重点关注新的诊疗技术和方法，以提高治疗水平和效果。

新生儿溶血病是一项复杂的工作，需要医护人员具备丰富的专业知识和临床经验。

以上标准操作规程只是提供了一种参考，实际工作中还需要结合具体情况进行个性化的治疗方案和操作流程。

溶血性贫血的实验室检测（二）引言：溶血性贫血是一种由于红细胞溶解增加引起的血液疾病。

实验室检测在诊断和评估溶血性贫血的病因时起着重要作用。

本文将介绍溶血性贫血的实验室检测方法，以便提供更准确的诊断和治疗指导。

正文：一、红细胞指标的测定1. 血红蛋白测定：通过测定全血或血清中的红细胞血红蛋白含量，评估溶血性贫血的程度。

2. 红细胞计数：通过计算单位体积内红细胞的数量，确定溶血性贫血患者红细胞的减少情况。

3. 红细胞体积分布宽度测定：反映红细胞体积的分布情况，帮助鉴别溶血性贫血与其他疾病。

二、血清标志物的测定1. 胆红素测定：通过测定血清中的胆红素水平来评估溶血性贫血的程度，可区分溶血性贫血的类型。

2. 血清乳酸脱氢酶测定：高乳酸脱氢酶水平提示溶血性贫血进展较严重，可协助评估疾病的严重程度。

3. 血清间接胆红素测定：通过测定血清中的间接胆红素水平，推测血红蛋白溶解释放的胆红素量。

三、血型与抗人球蛋白试验1. ABO血型与Rh(D)血型测定：确定患者血型，为输血提供参考依据。

2. 抗人球蛋白试验：通过检测患者血清对人类红细胞的球蛋白反应，判断溶血性贫血存在的机制。

四、外周血涂片与骨髓涂片检查1. 外周血涂片检查：观察红细胞形态，鉴别溶血性贫血与其他类型贫血的区别。

2. 骨髓涂片检查：观察骨髓中红细胞的生成情况和异常，评估溶血性贫血的病因。

五、其他辅助检查方法1. 血培养：筛查溶血性贫血与感染相关的细菌或寄生虫。

2. 自身抗体检测：检测患者血清中的自身抗体，帮助诊断自身免疫性溶血性贫血。

总结：溶血性贫血的实验室检测方法包括红细胞指标测定、血清标志物测定、血型与抗人球蛋白试验、外周血涂片与骨髓涂片检查以及其他辅助检查方法。

通过这些检测手段的组合使用，能够准确诊断溶血性贫血的类型和病因，为治疗方案的选择和疾病的监测提供依据。

探讨不规则抗体导致的新生儿溶血病实验室检查及临床输血策略不规则抗体导致的新生儿溶血病是一种严重的疾病，如果不及时诊断和治疗，可能会导致新生儿死亡。

实验室检查及临床输血策略对于新生儿溶血病的诊断和治疗至关重要。

本文将探讨不规则抗体导致的新生儿溶血病的实验室检查内容及临床输血策略。

一、实验室检查1. 血型鉴定对于母亲和新生儿进行血型鉴定是非常重要的。

母亲和新生儿的Rh血型和ABO血型需在孕期进行确定，以及在新生儿出生后进行确认。

如果母亲是Rh阴性的，而新生儿是Rh 阳性的，可能会导致免疫性溶血病。

2. Coombs试验Coombs试验是检测患者血液中是否含有抗体的一种常用方法。

通过这项试验可以检测母体抗体对新生儿红细胞的敏感性。

如果Coombs试验呈阳性，则可能表明新生儿溶血症已经发生。

3. 血清学检测进行母血和新生儿血清学检测，以确定母体是否存在不规则抗体，并且对这些抗体进行定位和鉴定。

这一步是非常重要的，因为不规则抗体的种类和滴度将决定治疗的临床策略。

4. 血常规检查对新生儿进行血常规检查，检测其血红蛋白和红细胞计数，以判断溶血的程度和严重程度。

同时也可以通过血常规检查观察新生儿的贫血情况。

二、临床输血策略当确诊为不规则抗体导致的新生儿溶血病后，需要根据临床情况确定是否需要输血。

一般来说，新生儿溶血病的治疗指征包括血红蛋白浓度低于正常范围、贫血明显、黄疸明显等。

2. 选择血液制品根据母体抗体的种类和滴度，选择合适的血液制品输血给新生儿。

通常可以选择新鲜血浆、红细胞悬浮液等进行输血。

3. 注意输血反应在进行输血时，需要密切监测新生儿的反应情况，防止发生输血反应。

特别是对于溶血病的新生儿，由于其对外界抗原过敏，对输血的选择和过程需十分慎重。

4. 针对性治疗对于不同类型的溶血病，需要进行针对性的治疗。

有些溶血病可能需要同时进行免疫抑制治疗，以减轻新生儿的免疫反应，防止溶血的继续发展。

5. 密切监测治疗效果在进行输血治疗后，需要密切监测新生儿的血常规情况，同时也需要观察其黄疸和贫血情况。

新生儿溶血病血清学检查操作规程原理新生儿溶血病是由母婴血型不合引起，可见于ABO、Rh及MN等血型系统。

胎儿和新生儿红细胞被来自母亲的IgG抗体包被，并在婴儿的单核-巨噬细胞系统（网状内皮系统）受到免疫性破坏，出现溶血，表现出相应的症状。

病情严重程度因个体差异、抗体类型、抗体效价等不同而异。

目的规范新生儿溶血病血清学检查操作；查找新生儿溶血病发生的原因，协助临床进行实验室诊断及治疗；保证临床用血的安全性和有效性。

职责输血科技术人员负责新生儿溶血病血清学检查。

适用范围母婴血型不合引起的新生儿溶血病的血标本。

支持文件《中国输血技术操作规程》（血站部分）.天津：天津科学技术出版社1997《输血技术学》第2版.北京：人民卫生出版社，2002《输血科（血库）工作手册》莞市中心血站2006材料或设备1、材料抗-A、抗-D定型试剂、抗球蛋白试剂、ABO反定型试剂红细胞、筛选细胞、谱细胞、生理盐水、新生儿静脉血、产妇及患儿父亲血标本2、设备血清雪专用离心机、电热恒温水浴箱、水浴振荡仪、显微镜、小试管、滴管、小玻棒操作步骤一、血标本采集及处理采集患儿及其父亲与母亲血标本各3-5ml，分离出血清，配制3%-5%红细胞盐水悬液。

如果患儿血标本为不抗凝血，则在一小玻璃漏斗颈部置一适当大小的棉球上，一边加生理盐水，一边用玻棒挤压血块，收集漏斗下面的红细胞悬液。

二、患儿血标本具体操作执行《ABO和Rh血型鉴定操作规程》。

ABO血型测定只做正定型。

1、直接抗球蛋白试验具体操作执行《抗球蛋白操作试验规程》中的直接抗球蛋白试验部分。

2、游离抗体检测⑴、取小试管3支，分别标明A、B、O细胞，每管加患儿血清2滴，再分别加入3%-5%的A、B、O、反定型试剂红细胞悬液1滴。

⑵、37℃致敏1h后取出，若发生凝集，不必继续往下做。

⑶、若不凝集，用盐水充分洗涤3次反应物后加入抗球蛋白血清1滴。

1300g离心15s，轻轻悬浮细胞，肉眼观察凝集反应，记录结果。

SOP_10-4 新生儿溶血病血型血清学检查标准操程序一、目的：确保输血安全，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。

二、适用范围：血型鉴定。

三、操作人员：检验科授权工作人员。

四、操作步骤：新生儿溶血病包括:①母婴血型不合新生儿溶血病;②红细胞葡萄糖6磷酸脱氢酶缺陷;③球型红细胞增多症。

因为母婴血型不合所致新生儿溶血病为首先发现,所以新生儿溶血病特指为母婴血型不合所致的新生儿溶血,另外两种疾病是以疾病原因命名。

造成新生儿溶血病的抗体有：ABO系统（IgG抗A、IgG抗B、IgG抗AB）；Rh系统（抗D、抗E、抗Ce、抗cE、抗c）；Kidd系统（抗Jka、抗Jkb）；MNSs系统（抗-M、抗N、抗S、抗-s）；Kell系统（抗K、抗-k）；Daff系统（抗Fya、抗Fyb）；Diego系统（抗-Dia、抗-Dib）。

ABO系统新生儿溶血病多见于ABO血型不合的母子。

O型母亲多见(90%以上),多由IgG-AB所致。

A型、B型母亲少见(不足10%),多由IgG抗A或抗B所致。

Rh系统则多见于母子ABO血型相合者(母有输血史除外),以抗D为多见,为抗E,抗cE等。

其它系统为母子其它血型系统不相合。

1.原理：母体内存在与胎儿红细胞不相合的抗体。

抗体的产生是胎儿的红细胞抗原(由父亲而来的恰好是母体红细胞上所缺少)进入母体,刺激母体产生了免疫性抗体。

胎儿红细胞被来自母亲的IgG抗体所包被，并在婴儿的网状内皮系统内受到免疫必破坏。

另外，母亲有输血史,产生的免疫性抗体恰巧与胎儿红细胞抗原是相应的，也会发生新生儿溶血病。

2.检查方法2.1 ABO新生儿溶血病的检查* 母血清中天然抗体A （B ）用型物质或2-ME 中和后进行试验。

夫妇或母子间ABO 血型关系：妇 夫血型 子血型血型 血清抗体 配合 不配合 配合 不配合O 抗A 、B O A 、B 、AB O A 、BA 抗B A 、O B 、AB A 、O B 、ABB 抗A B 、O A 、AB B 、O A 、ABAB A 、B 、O 、AB A 、B 、AB（1）ABO 定型：新生儿血清中的同种抗体来源于母亲,所以新生儿的ABO 检查完全依靠细胞定型(正定型),如果ABO 定型为O 型,则可排除ABO-HDN 的可能。

新生儿溶血病检测操作SOP一、产前诊断1.夫妇血型检测（微柱凝胶检测法：ABO、Rh(D)血型定型检测卡）将红细胞稀释至1% 红细胞生理盐水悬液；撕开微胶卡的封膜，于正定管蓝A、黄B、灰D、Control微柱管反应腔中加入1% 待检 RBC 生理盐水悬液各50μl；于反定管白色A、B、O、自身管分别对应加入% A1、B、O型试剂红细胞和待检红细胞生理盐水悬液50μl，再分别加入待检血浆（血清）50μl；将检测卡室温反应≥10 min,取出，置离心机1000r/min 2min，1800r/min 3 min离心；取出，判定结果（凝集强度判断详见结果判定示图）。

2.孕妇抗体效价的测定（微柱凝胶检测法：抗人球蛋白检测卡）孕妇IgG(抗A/抗B)效价取待检血清和2-Me(二巯基乙醇)应用液各，充分混匀，37℃水浴2小时（以充分破坏血清中的IgM类抗体）。

取4支干净试管排于试管架上；将第一管加入50微升中和血清和毫升低离子介质（原液为1:1稀释，此时稀释倍数为原液的64倍）。

第2－4管中分别加入400微升低离子介质；从第一管中吸出400微升的液体加入第二管，混匀，在从第二管吸出400微升加入第三管混匀，依次倍比稀释。

取抗人球蛋白检测卡，撕去铝箔，在4管中个依次加入倍比稀释好的灭活血清50微升和1％的标准红细胞（或父亲红细胞）低离子介质(LIM)悬液50微升。

将加好样的检测卡入生科孵育器中孵育15分钟。

将孵育好的检测卡放入生科离心机中离心5分钟（1000r/min 2 min，1800r/min 3 min），（离心必须在加样后30分钟内进行）取出，判定结果（凝集强度判断详见结果判定示图）临床参考值：孕妇IgG(抗A/抗B)效价≤64。

孕妇IgG(抗D)效价测定确定孕妇为RhD阴性，丈夫为RhD阳性。

取待检血清和2-Me(二巯基乙醇)应用液各，充分混匀，37℃水浴2小时（孕妇血清与O型RhD阳性红细胞反应盐水法为阳性需要灭活，阴性不需要灭活）。