标准菌株使用标准操作规程
1检验目的
对实验室的标准菌株进行合理的保存，并规范合理的使用流程，保证菌株的性能稳定可靠。2范围
微生物实验室保存的标准菌株。
3职责
微生物组工作人员正确执行本操作规程。
4术语和定义
4.1 标准菌株
其特征进行了分类和描述，有明确的来源。ATCC
( AmericanTypeCultureCollection )美国标准菌株收藏中心。
4.2 标准储备菌株
标准菌株经过一代转接后获得的同种菌株。
4.3 工作菌株
标准储备菌株传代后得到的同种菌株。
4.4 标准培养物
标准菌株、标准储备菌株、工作菌株的统称。
4.5 质控菌株
ATCC最佳，但当无法获得时可以使用ATCC演化的菌株或我国国家菌种库储存的
标准菌株。特殊情况，例如定性试验可用已知的菌种作为质控菌株。室间质评的菌株即可。
5保存程序
5.1标准菌株
用1ml无菌的小牛血清或营养肉汤溶解。根据菌种的生长特点，接种到新鲜培养基上
选择适宜的培养条件培养18-24h o酵母菌要求3天，形成孢子的微生物宜保存孢子。
5.2标准储备菌株
成分有蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化钠、甘油、纯化木。相当于20%勺甘油。挑取5环
菌落加入到1ml甘油肉汤中混匀。苛养菌可以适当增加菌量。-80 C保存。除链球菌
和嗜血杆菌以外细菌均可使用。保存期限1-5年。
成分为脱纤维羊血。挑取5环菌落加入到1ml甘油肉汤中混匀。苛养菌可以适当增加菌量。-80 C 保存。主要用于保存链球菌、嗜血杆菌及厌氧菌。保存期限1-5年。
5.3工作标准菌株
由标准储备菌株传代得到的菌株。标准储备菌株对多向下传三代。过多的传种会
增加变异的机会。标准储备菌株根据菌种特点选择适宜的培养基和培养条件进行培养18-24h即工作标准菌株。储存在2-8 C,可放四周。个别营养要求高的为2周，例如肺炎链球菌和嗜血杆菌。使用时应编号并登记。
5.4编号方法
每个菌的保存管都要有唯一的编号，签字笔标注，便于查找和管理。
5.5记录管理
5.5.1菌种应有严格的登记。每个编号都要有详细的记录包括来源、
传代、保存方法、 使用记录、使用原因、高压灭菌记录等。附表《标准菌株记录表》 《标准储备菌株记 录
表》
5.5.2菌种保管应有专人负责，保存于专用冰箱中，双人双锁，确保菌种安全。保管 人员变动时，
必须严格交接手续。
5.5.3各种菌种应按规定时间接种，注意菌种有无污染及变异，如发现变异时，应及 时更换
6使用流程
标准菌株 购买的标准菌株，编号, -------------- 用完第二天咼压
复苏接种合适的培养基，孵育」^ 性能验证
标准储备 挑取典型的菌落至V 合适的稳定齐U 中，编号, --------- 80 C 保存,_准备_n
周质控 丨 月质控 每周取出一支标准 每月取出一支标准
…储备菌株传种合适 储备菌株传种合适
储备菌株 ____________ L
直接作为工作菌株使用，第二天高压灭菌 管用
完第—
也可以用最后一天 的的工作菌株作为
传代培养物继续使
日质控
每周取出一支标准 储备菌株传种合适
传代培养物可以作
以第一天的天每作都
用天后培养物养一
个新的菌株，作为 重新取一直标准储 Y 备菌
株传种，进入
传代培养
作为“储存标准菌株” 进行多个分装保存，按
0代
7.2用氧化酶、触酶、上机等生化试验，鉴定菌种有没有变化 7.3如果有污染或怀疑有问题时，应准备新的首次传代物或者获取新的标准菌株。
8参考文献
序号
唯性编号
文献名称
9.1
ISBN978-7-117-19862-2/R
《全国临床检验操作规程》第四版
• 19863
9.2
ISBN978-7-5478-1226-6/R
《临床微生物学诊断与图解》第三版
• 395
9.3 GBT27405-2008 实验室质量控制规范食品微生物检测 9.4 SNT2632-2010 微生物困种常规保臧技术规程 9.5
WST232-2002
商业微生物培养基质量检测规程
7.1〉观察菌落物典型
形态是否符合菌种。有没有杂菌生长。 菌株不能超过3代
每天传代平板作为第二天的工作标准
进行纯度 检查和生
可以再重复一周，规则 室内质
同上。但一般来说工作
。作
