生物碱类成分的薄层色谱分析

• 2．提取方法： • 冷浸、渗漉、超声波、索氏提取、热回
流提取
• （三）生物碱样品的精制
• 1．萃取法 • 2．色谱法 • 3．离子对法
三．生物碱薄层色谱的定性分析
• 1．展开剂 2．吸附剂 3．显色剂 • 4. 对照品定性分析 • （化学对照品、对照药材、阴性对照） • 5．以Rf值为基准定性分析 • （边缘效应及其它影响因素） • 6．薄层扫描定性分析 • （薄层指纹图谱）
常用含生物碱的中药
•
• 生物碱的理化性质： • 1. 物理性质 • 2. 旋光性 • 3. 酸碱性 • 4. 溶解度 • 5. 沉淀反应
一．影响薄层色谱分析的主要因素
• （一）样品的预处理及供试液的制备
• • • • •
样品供试液的精制方法： 1．单一溶剂萃取法 2．分段萃取法 3．液液萃取法 4．固液萃取法
黄连的TLC
黄柏的TLC
山豆根 TLC
苦参TLC-1
苦参TLC-1
苦参 TLC-2
川贝母TLC
伊贝母TLC
淅贝母TLC
天仙子TLC
华山参TLC
洋金花TLC
马钱子TLC
青风藤TLC
罂粟壳TLC
延胡索TLC
四．生物碱薄层色谱的定量分析
• 1．薄层色谱 - 分光光度法
生物碱类成分的薄层色谱分析
•
生物碱（alkaloid）是一类含氮的碱性 天然有机物，大多具有复杂的环状结构， 氮原子多在环内，具光学活性，有显著的 生理作用，是中药中重要的有Hale Waihona Puke Baidu成分。
• 分布广泛，以双子叶植物最多，其次是单
子叶植物、裸子植物。
•
种类多，按结构可分为12类。大具有 重要生理活性的大多集中于异喹啉、吲哚、 莨菪烷类衍生物。
质能在Rf值0.3 – 0.7之间 • （2）溶剂的选择性：要求达到最佳分离度
• （六）温度对薄层色谱的影响 • （七）影响薄层色谱的其它因素
二．生物碱样品液制备
• （一）与天然药物化学提取、分离、定性
的不同点 • （二）生物碱提取 • 1．提取溶剂 • （1）非极性溶剂 • （2）极性溶剂 • （3）混合溶剂
（四）溶剂蒸气在薄层色谱中的作用： 饱和问题 （五）关于薄层色谱的优化及溶剂系统 的选择
•
1．依靠薄层色谱分离混合物物质需要解决 的主要问题有两个： • （1）相邻物质对的分离 • （2）在一个宽极性范围内的多组分混合 物的分离
• 2．展开剂的选择和优化 • 主要考虑两个方面： • （1）溶剂的极性：要求使欲分离的主要物
• （1）斑点定位：不加显色剂显色；使用显
色剂（可挥去；有显色反应） • （2）洗脱：溶剂的选择 • （3）测定：薄层取样量一般为几微克-几 十微克，常用测定方法为UV或可见分光度 法。 • 注意事项：空白对照；回收率的检测
2．薄层扫描法
• （1）吸附剂和薄层板的选择 • （2）点样方法 • （3）色谱条件的选择：展开剂、显色剂 • （4）相关方法学考察 • （5）误差的来源
（二）薄层色谱的上样技术
• 不良的上样是最主要的误差来源之一 • 1．原点位置对样品容积的负荷量是极
为有限的 • 2．上样环行色谱效应 • 3．供试液的溶剂在原点的残留 • 4．上样装置对薄层表面的机械损伤对 色谱质量的影响
（三）吸附剂的活性与相对湿度 对薄层色谱的影响
• • • •
• •
1．吸附剂的活性：是由表面能和表面积决定的。 (1) 硅胶 – 硅醇基 – 与化合物形成氢键 (2) 薄层板活化目的：水合硅醇基 – 游离硅醇基 (3) 在不同的相对湿度下，可达到不同程度的吸 附平衡 (4) 薄层色谱的重现性差，薄层板在不同的相对 湿度下操作是主要原因之一 2．相对湿度的控制方法：展开缸中放入适当浓度 的硫酸